lncRNA OCC-1通过破坏HuR蛋白的稳定抑制结直肠癌真人投注平台的生长[1]
栏目:最新研究动态 发布时间:2018-07-06
OCC-1是结直肠癌中最早注释的lncRNA之一。然而,它的功能在很大程度上仍不为人所知。四川大学的研究人员研.....

OCC-1是结直肠癌中最早注释的lncRNA之一。然而,它的功能在很大程度上仍不为人所知。四川大学的研究人员研究发现OCC-1在结直肠癌中发挥致癌作用。在体内和体外试验中,敲除OCC-1可促进真人投注平台生长,这在很大程度上是由于其抑制G0G1G1S期真人投注平台周期转变的能力。此外,过表达OCC-1可以抑制OCC-1敲除真人投注平台的生长。癌症相关的RNA结合蛋白HuR (ELAVL1)可以结合并稳定成千上万的mRNAOCC-1通过与HuR结合并破坏其稳定性而发挥作用。OCC-1增强了泛素E3连接酶β-TrCP1HuR的结合,使HuR易受泛素化和降解的影响,从而降低HuR及其靶mRNA(包括与癌症癌真人投注平台生长直接相关的mRNA)的表达水平。这些发现揭示了lncRNA OCC-1可以通过调节RNA结合蛋白HuR的稳定性,在转录后水平上调节大量mRNA的表达水平。


研究路线图:

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研究结果:

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1 OCC-1在结直肠癌中发挥致癌作用。(A)对两组独立的临床样本基因表达数据进行分析,发现在结直肠癌晚期肿瘤(T)期,OCC-1表达显著下调。(B) RNA FISH发现OCC-1Caco-2HCT116真人投注平台中主要分布于真人投注平台质。(C) RT-qPCR分析显示,在Caco-2HCT116真人投注平台中两个独立的shRNAsRNA干扰片段)可有效降低OCC-1 RNA的水平。(D) CCK-8检测显示,在Caco-2HCT116真人投注平台中,OCC-1被敲除后真人投注平台增殖显著增加。(E) Ki67染色显示,OCC-1敲除真人投注平台中Ki67阳性增殖真人投注平台的比例明显高于对照组。(F) FACS分析显示OCC-1敲除后,Caco-2真人投注平台的真人投注平台周期分布情况。(G)菌落形成实验表明,OCC-1敲除真人投注平台比对照真人投注平台形成更多的菌落。


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2体内敲除OCC-1促进结直肠癌真人投注平台的生长。通过皮下注射OCC-1敲除真人投注平台到BALB/c裸鼠的两翼,进行成瘤实验研究。


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3OCC-1敲除的真人投注平台中过表达OCC-1抑制真人投注平台生长。


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4Caco-2真人投注平台系中,敲除OCC-1增加真人投注平台生长相关基因的表达。


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5OCC-1HuR蛋白的作用关系。(A) RNA pull-down实验和western blot证实HuR作为蛋白伴侣特异性结合OCC-1 3’UTREGFP RNARNA对照。ACTBGAPDH是蛋白质对照。(B) RIP证实OCC-1HuRCaco-2真人投注平台中的关系。GAPDH mRNA被用作non-HuR靶基因对照。(C) OCC-1型矫形器3’UTR的示意图显示了HuR的结合motifs(D)维恩图展示了OCC-1抑制基因显著富集于早前的CLIP实验确定的HuR靶基因集合中。大约74%OCC-1抑制基因在芯片分析中也是HuR靶基因。(E) RIP实验显示,6个被选中的OCC-1抑制基因Caco-2真人投注平台中也与HuR发生了相互作用。(F) RT-qPCR()western blot()结果显示靶向HuR的干扰片段显著降低HuRmRNA和蛋白表达水平。(G) RT-qPCR分析显示,敲除HuR后,OCC-16个被选择的OCC-1抑制基因的表达都下调。


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6 OCC-1通过增强HuR与泛素E3连接酶β-TrCP1的结合,促进HuR的泛素化和降解。


1.         Lan, Y., et al., Long noncoding RNA OCC-1 suppresses cell growth through destabilizing HuR protein in colorectal cancer. Nucleic Acids Res, 2018. 46(11): p. 5809-5821. (IF=11.561)


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